Ядро клеточной и молекулярной визуализации

Миссия основного центра клеточной и молекулярной визуализации (CMI) Центра интегративной нейронауки COBRE заключается в предоставлении инфраструктуры и ресурсов, необходимых для выполнения клеточной и молекулярной визуализации биомолекул, а также подготовки среды для дальнейших исследований в Университете Невады, Рино ( УНР). Основной объект расположен на третьем этаже здания Fleischmann Lifesciences на биологическом факультете Научного колледжа.

Центр CMI Core обеспечивает доступ к самым современным инструментам, включая новую систему двухфотонной визуализации Scientifica HyperScope для сканирования глубоких тканей живого мозга и целых животных, систему конфокального микроскопа Leica SP8, оснащенную системой LIGHTNING, позволяющей захватывать детали клеток и наблюдать динамику с разрешением до 120 нм, вертикальный микроскоп Leica Thunder 3D Tissue, стереомикроскоп Leica Thunder Model Organism, предназначенный для визуализации эмбрионов, органов и мелких организмов, таких как Drosophila и C. elegans, фосфовизер GE для нозерн-блоттинга , BioRad ChemiDoc для вестерн-блоттинга, два прибора BioRad для ПЦР в реальном времени для точных и количественных ПЦР, QIAgility для автоматической настройки ПЦР, спектрофотометр GeneSys 180 UV/Vis и флуорометр Quibit 4.

Дополнительные возможности ядра включают инструменты для подготовки среды и ресурсы для выращивания дрозофилы и C. elegans, используемых в качестве модельных организмов.

Местоположение: FA 318 (требуется доступ к ключу от двери).

Двухфотонная микроскопия стала незаменимым инструментом клеточной нейробиологии, позволяющим получать флуоресцентные изображения с высоким разрешением клеток in vitro и in vivo, живого мозга и целых животных. Система HyperScope представляет собой изготовленный по индивидуальному заказу двухфотонный микроскоп, оснащенный широко перестраиваемым ти-сапфировым лазером Mai-Tai eHPDS (690–1040 нм), несколькими объективами (16x, 20x и 40x), установленный на макетной плате Thorlabs и антивибрационный стол. С помощью ПЗС-камеры Scientifica SciCam Pro можно выполнять функциональную визуализацию видео с частотой кадров 24 кадра в секунду (полное разрешение) и 40 кадров в секунду (бинирование 2 x 2). Сборка детектора включает в себя один модуль ФЭУ со смещением в красную область и один модуль ФЭУ GaAsP, а также устройство эпифлуоресцентной визуализации с наборами фильтров для GFP (затухание 470/40x, излучение 525/50 м) и mCherry (затухание 560/40x, излучение 630/75 м). Зеркала сканирования на пути визуализации могут быть расположены в нескольких конфигурациях в зависимости от ваших потребностей. При последовательном соединении до трех зеркал вы можете выбирать между гальво/гальво (GG), резонансным/гальво (RG) или резонансным/гальво/гальво (RGG). Микроскоп оснащен сверхплавным приводом оси Z для обеспечения движения без вибрации, при этом ось Z управляется с помощью программного обеспечения для сбора z-стеков с минимальным размером шага 0,1 мм. Добавление пьезо-позиционера объектива по оси Z позволяет получать объемные изображения размером до 400 мм. Микроскоп можно легко настроить и переключить между приложениями in vitro и in vivo, удалив оптику предметного столика и стояк. Система заключена в затемненную клетку для предотвращения светового и шумового загрязнения биологических образцов.

Эта платформа включает отмеченное наградами программное обеспечение для сбора данных Scientifica SciScan, позволяющее пользователям легко интегрировать SciScan со специально написанными приложениями, такими как LabView и ScanImage. Программный интерфейс ScanImage (Vidrio Technologies), используемый Scientifica, был разработан HHMI Janelia Farm специально для нейробиологических приложений и считается самым передовым программным обеспечением для двухфотонного лазерного сканирования на рынке.

Ключевые уникальные особенности Scientifica HyperScope включают в себя:

Местоположение: FA 324

Конфокальная система Leica TCS SP8 LIGHTNING позволяет извлекать информацию об изображении с получением сверхвысокого разрешения, которое использует субдифракционное боковое разрешение конфокальной микроскопии. Он позволяет улавливать детали клеток и наблюдать динамику с разрешением до 120 нм, что близко к возможностям микроскопа сверхвысокого разрешения STED. Вертикальный конфокальный прибор способен одновременно собирать данные с трех каналов обнаружения (два ФЭУ, один HyD) с использованием нескольких лазерных линий (диод 405, синий 488, зеленый 552, красный 638 нм). Конфокальная система оснащена обычным тандемным сканером (8 кГц), столиком Super Z-galvo типа S, несколькими объективами (10x, 20x, 25x, 40x, 63x) и стоит на антивибрационном столе. Конфокальный компьютер подключен к компьютерной рабочей станции, оснащенной программным обеспечением Leica LAS-X и 30-дюймовым монитором.